МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

	
	
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА
	
	ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

_________________________________________________________________________________________________
Цветки бузины черной 			ФС 42-
Flores sambuci nigrae			Взамен ФС 10 ГФ СССР XI издания 
_________________________________________________________________________________________________

Собранные в период цветения, высушенные и обмолоченные цветки и бутоны дикорастущего и культивируемого кустарника бузины черной – Sambucus nigra L. сем. бузиновые – Sambucaceae (Жимолостные – Caprifoliaceae).

Подлинность

Внешние признаки. Цельные цветки. Отдельные цветки, бутоны на коротких голых цветоножках длиной до 2-3 мм и без них, части соцветий. Цветки с пятизубчатой спайнолепестной чашечкой и венчиком из 4-5 лепестков, сросшихся у основания, диаметром до 8 мм. Диаметр бутонов – до 3 мм. Лепестки венчика желтые, широко-яйцевидные, почти округлые. Чашелистики треугольные, эллиптические или яйцевидные желтовато-зеленого цвета. Тычинок 5, приросших к трубке венчика, завязь почти шаровидная короткая полунижняя, трехгнездная. Запах специфический ароматный. Вкус водного извлечения пряный.
Измельченные цветки. Отдельные цельные цветки, бутоны на коротких голых цветоножках и без них, части цветков, бутонов и цветоножек, проходящие сквозь сито размером 7 мм. Цветки с пятизубчатой спайнолепестной чашечкой и венчиком из 4-5 лепестков, сросшихся у основания. Лепестки венчика желтые, широко-яйцевидные, почти округлые. Чашелистики треугольные, эллиптические или яйцевидные желтовато-зеленого цвета. Тычинок 5, приросших к трубке венчика, завязь почти шаровидная короткая полунижняя, трехгнездная. Запах специфический, ароматный. Вкус водного извлечения пряный.
Порошок. Смесь частиц цветков, бутонов и цветоножек, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Цвет желтый. Запах специфический, ароматный. Вкус водного извлечения пряный.
Микроскопические признаки. Цельные цветки. При рассмотрении лепестка с поверхности должны быть видны многоугольные со слабоизвилистыми тонкими стенками клетки верхнего эпидермиса по краю с сосочковидными выростами; эпидермис нижней стороны лепестка характеризуется более крупными клетками с сильно извилистыми стенками. Клетки эпидермиса по краю с сосочковидными выростами. Устьица только на нижней стороне лепестка, округлые аномоцитного типа. Кутикула с обеих сторон лепестка морщинистая. Редко с нижней стороны лепестка (у его основания) могут встречаться простые и железистые волоски. Простые волоски одноклеточные, тонкостенные, со штриховатой кутикулой. Железистые волоски крупные с одно- и многоклеточной округлой или овальной головкой, различной формы на одно- и многоклеточной ножке. 
Клетки верхнего эпидермиса чашелистика слегка вытянуты, с тонкими слабо извилистыми стенками. Клетки эпидермиса с нижней стороны чашелистика более крупные, слегка вытянуты, с извилистыми тонкими стенками. Кутикула с обеих сторон морщинистая. Устьица расположены в основном с нижней стороны, округлые аномоцитного типа. С верхней и нижней стороны чашелистика имеются сосочковидные выросты, особенно много их по краю. С нижней стороны чашелистика встречаются простые и железистые волоски. Простые волоски одноклеточные, тонкостенные, со штриховатой кутикулой. Железистые волоски крупные с одно- и многоклеточной головкой, различной формы на одно- и многоклеточной ножке. Пыльца трехбороздная, эллипсоидальная гладкая.
Эпидермис цветоножки представлен вытянутыми прямоугольными клетками с ровными стенками, с овальными устьицами и нередко с сосочковидными выростами. Эпидермис цветоножки у основания цветка обильно покрыт головчатыми и простыми волосками.
Измельченные цветки. Для исследования берут наиболее крупные части чашечки, венчика и цветоножки. При рассмотрении лепестка с поверхности должны быть видны многоугольные со слабоизвилистыми тонкими стенками клетки верхнего эпидермиса, по краю с сосочковидными выростами; эпидермис нижней стороны лепестка  характеризуется более крупными клетками с сильно извилистыми стенками. Клетки эпидермиса по краю с сосочковидными выростами. Устьица только на нижней стороне лепестка, округлые аномоцитного типа. Кутикула с обеих сторон лепестка морщинистая. Редко с нижней стороны лепестка (у его основания) могут встречаться простые и железистые волоски (форма и размеры волосков такие же как у чашелистиков). Простые волоски одноклеточные, тонкостенные, со штриховатой кутикулой. Железистые волоски крупные с одно- и многоклеточной головкой, различной формы на одно- и многоклеточной ножке.
Клетки верхнего эпидермиса чашелистика слегка вытянуты, с тонкими слабо извилистыми стенками. Клетки эпидермиса с нижней стороны чашелистика более крупные, слегка вытянуты, с извилистыми тонкими стенками. Кутикула с обеих сторон морщинистая. Устьица расположены в основном с нижней стороны, округлые аномоцитного типа. С верхней и нижней стороны чашелистика имеются сосочковидные выросты, особенно много их по краю. С нижней стороны чашелистика встречаются простые и железистые волоски. Простые волоски одноклеточные, тонкостенные, со штриховатой кутикулой. Железистые волоски крупные с одно- и многоклеточной головкой, различной формы на одно- и многоклеточной ножке. Пыльца трехбороздная, эллипсоидальная гладкая.
Эпидермис цветоножки представлен вытянутыми прямоугольными клетками с ровными стенками, с овальными устьицами и нередко с сосочковидными выростами. Эпидермис цветоножки у основания цветка обильно покрыт головчатыми и простыми волосками.

Рисунок - 1. Цветки бузины черной. Лепесток. Слева: нижний эпидермис, 
(ув.х125). Справа: верхний эпидермис (основание лепестка 
с морщинистой кутикулой) (ув.х250)

Рисунок - 2. Цветки бузины черной (порошок). Слева: обрывок лепестка (верхний эпидермис); справа: обрывок чашелистика с сосочковидными выростами, (ув.х125). 1 – устьица; 2 – головчатые волоски; 3 – сосочковидные выросты

Рисунок - 3. Цветки бузины черной (порошок). Чашелистик. Слева: сосочковидные выросты, (ув.х250); справа: головчатые волоски (ув.х125);

Рисунок - 4. Цветки бузины черной. Эпидермис цветоножки. 
Простые волоски. Слева: порошок (ув.х250)

Рисунок - 5. Цветки бузины черной. Пыльца, (ув.х500).

Порошок. При рассмотрении микропрепаратов из порошка цветков бузины видны обрывки эпидермиса лепестка с многоугольными слабо извилистыми стеками клеток и сосочковидными выростами; обрывки эпидермиса лепестка с сильно извилистыми стенками клеток и округлыми устьицами, обрывки эпидермиса чашелистика со слабоизвилистыми стенками клеток и округлыми устьицами; на эпидермисе лепестка и чашелистика видна складчатость кутикулы; отдельные простые и одноклеточные волоски с тонкими стенками и штриховатой кутикулой и головчатые волоски – крупные, с округлой или овальной одно- и многоклеточной головкой на одно- и многоклеточной ножке или обломки волосков; обрывки эпидермиса цветоножки с прямоугольными клетками ровными стенками, с овальными устьицами, сосочковидными выростами, может быть с простыми и головчатыми волосками; трехбороздная эллипсоидальная гладкая пыльца.

Определение основных групп биологически активных веществ
1.	На линию старта хроматографической пластинки «Сорбфил» (10 х 10 см) или «Силуфол» (15 х 15 см) наносят 50 мкл извлечения (см. раздел «Количественное определение»), рядом наносят 50 мкл 0,1 % раствора СО рутина. Пластинку с нанесенными пробами высушивают на воздухе, помещают в камеру со смесью растворителей этилацетат-метанол-вода (77:12:11) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей дойдет до конца пластинки, ее вынимают из камеры, высушивают на воздухе и просматривают в УФ свете при длине волны 366 нм. Должно быть видно две зоны адсорбции веществ синего цвета с Rf около 0,28 и Rs около 1,75 - на пластинках «Сорбфил»; с 
Rf около 0,35 и Rs около 1,54 на пластинках «Силуфол», соответствующие рутину и изокверцитрину. Затем пластинку обрабатывают алюминия хлорида раствором 2 % в спирте, нагревают ее в течение 2-3 мин в сушильном шкафу при температуре 
100 °С, при этом пятна, указанные выше, приобретают ярко-желтую окраску (флавоноиды).
Примечание 
Приготовление раствора СО рутина. Около 0,05 г (точная навеска) рутина, высушенного в течение 3 часов при температуре 
130-135 °С, растворяют при нагревании в спирте 70 % в мерной колбе вместимостью 50 мл и после охлаждения доводят объем раствора этим же спиртом до метки. Срок годности раствора 1 месяц при хранении в хорошо укупоренной таре, в прохладном защищенном от света месте.
Проверка пригодности хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если выполняется следующее требование: на хроматограмме смеси для проверки пригодности хроматографической системы два пятна должны быть четко видны и разделены.

2.	Цельное, измельченное или порошкованное сырье, проходящее сквозь сито с размером отверстий 1 мм, в количестве 1,0 г помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 20 мл спирта 50 % и нагревают на водяной бане при температуре 60 °С в течение 15 мин. Затем извлечение охлаждают до комнатной температуры, фильтруют через бумажный фильтр и упаривают до 1 мл. К полученному извлечению прибавляют 1 мл спирта 95 %, 0,1 г порошка магния и 
1 мл хлористоводородной кислоты концентрированной; постепенно появляется розово-красное окрашивание (флавоноиды).
Числовые показатели. Цельные цветки. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин не менее 2,0 %; экстрактивных веществ, извлекаемых водой не менее 30 %; влажность не более 14 %; золы общей не более 10 %; золы, не растворимой в хлористоводородной кислоте, не более 2 %; побуревших цветков не более 8 %; других частей растения (цветоносов, веточек, листьев) не более 10 %; измельченных частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, не более 8 %; органической примеси не более 1 %; минеральной примеси не более1 %.
Измельченные цветки. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин не менее 2,0 %; экстрактивных веществ, извлекаемых водой не менее 
30 %; влажность не более 14 %; золы общей не более 10 %; золы, не растворимой в хлористоводородной кислоте, не более 2 %; побуревших цветков не более 8 %; других частей растения (цветоносоов, веточек, листьев) не более 10 %; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм, не более 10 %; измельченных частиц, проходящих сквозь сито с размером отверстий 0,5 мм, не более 8%; органической примеси не более 1 %; минеральной примеси не более1 %.
Порошок. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин не менее 2,0 %; экстрактивных веществ, извлекаемых водой не менее 30 %; влажность не более 14 %; золы общей не более 10 %; золы, нерастворимой хлористоводородной кислоте, не более 2 %; частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями диаметром 2 мм не более 10 %; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,25 мм не более 5%. 
Примечание: 
Показатель «содержание флавоноидов в пересчете на рутин» определяется в сырье, предназначенном для получения водно-спиртовых извлечений, экстрактов.

Количественное определение. 
1. Определение суммы флавоноидов. Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито, размером 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) цветков помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 
100 мл, прибавляют 60 мл спирта 70 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения до комнатной температуры содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 100 мл, чтобы частицы сырья не попали на фильтр. В круглодонную колбу со шлифом прибавляют 45 мл спирта 70 %, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 мин. После охлаждения до комнатной температуры извлечение фильтруют через тот же фильтр в ту же мерную колбу. Объем раствора в колбе доводят до метки спиртом 
70 % и тщательно перемешивают (раствор А).
5 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора до метки спиртом 70 % (раствор Б). 5 мл раствора Б помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл спирта 95 %, 0,5 мл уксусной кислоты раствора 33 %, 1,5 мл алюминия хлорида раствора 10 %, 2 мл гексаметилентетрамина раствора 5 % и доводят объем раствора водой до метки. Тщательно перемешивают. Через 30 мин измеряют оптическую плотность полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 407 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 5 мл раствора Б, 10 мл спирта 95 %, 0,5 мл уксусной кислоты раствора 33 %, 2 мл гексаметилентетрамина раствора 5 % и воды до 25 мл. Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца рутина, обработанного аналогично испытуемому раствору: 1 мл раствора стандартного образца рутина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл спирта 95 %, 0,5 мл уксусной кислоты раствора 33 %, 1,5 мл алюминия хлорида раствора 10 %, 2 мл гексаметилентетрамина раствора 5%, доводят объем раствора водой до метки и тщательно перемешивают. Через 30 мин измеряют оптическую плотность. В качестве раствора сравнения используют смесь: 1 мл раствора стандартного образца рутина помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл спирта 95 %, 0,5 мл уксусной кислоты раствора 33 %, 2 мл гексаметилентетрамина раствора 5 % и доводят объем раствора водой до метки. 
Содержание флавоноидов пересчете на рутин в процентах в (X) вычисляется по формуле:
D • mo • 1 • 25 • 25 • 100 • 100                  D • mo • 100
X = ----------------------------------------------- = -----------------------;
          Do • a • 5 • 5 • 100 • 25 • (100 - W)       Do • а • (100 - W)

где:	D - оптическая плотность испытуемого раствора;
Do - оптическая плотность раствора РСО рутина;
mo - навеска рабочего стандартного образца рутина, г;
а -  навеска сырья, г;
W - влажность, %.

Примечание
Приготовление раствора стандартного образца рутина. См. раздел «Хроматография».
2. Приготовление раствора алюминия хлорида 10 %. 10 г алюминия хлорида безводного или 18 г алюминия хлорида 6-водного растворяют в 80 мл воды, фильтруют в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. Срок годности раствора 3 мес.
3. Приготовление гексаметилентетрамина раствора 5 %. 5 г гексаметилентетрамина растворяют в воде в мерной колбе вместимостью 100 мл и доводят объем раствора водой до метки. Срок годности раствора 6 мес. при хранении в хорошо укупоренной таре, в защищенном от света месте. 

3.	Определение содержания экстрактивных веществ, извлекаемых водой, проводят по ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье». Масса навески сырья 1,0 г.
Тяжелые металлы. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Радиоактивность. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания радионуклидов лекарственном растительном сырье».
Остаточные количества пестицидов. Определение проводят согласно ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». 
Микробиологическая чистота. Определение проводят согласно ОФС «Микробиологическая чистота».
Упаковка, маркировка и транспортирование. Осуществляется с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья».
Хранение. Хранение ЛРС осуществляется с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».